Insemination of bocachico fish (Prochilodus magdalenae) with fresh or cryopreserved semen: effect of spermatozoa/oocyte ratio / Inseminacion de bocachico (Prochilodus magdalenae) con semen fresco o crioconservado: efecto de la proporción espermatozoide/oocito / Inseminação do bocachico (Prochilodus magdalenae) usando sêmen fresco o criopreservado: efeito da razão espermatozoide/oócito

Background: cryopreservation is an important biotechnological tool in the conservation of biodiversity, particularly for endangered species. Objective: to evaluate six different spermatozoa/oocyte ratios using fresh and cryopreserved semen in bocachico fish (Prochilodus magdalenae). Methods: fresh semen was collected and its quality determined to verify cryopreservation feasibility. The semen was put in 5 mL straws and mixed with a solution (5.5% glucose, 12% egg yolk, and 10% dimethyl sulfoxide -DMSO-) in a 1:4 dilution (semen:solution). The semen was frozen in nitrogen vapor dry shipper for 30 min, rapidly transferred to storage thermos, and submerged directly into liquid nitrogen (LN; -196 °C). Straws were thawed at 60 ºC for 45 seconds. Motility, velocity, and sperm progressivity of fresh and cryopreserved semen were assessed using Sperm Class Analyzer (SCA®) software. Each proportion of spermatozoa/oocyte was assessed with 2 g of eggs (1,630 ± 87 eggs/g) to evaluate fertility (F), hatching (H), and larval survival (LS) rates. Results: the best reproductive performance for fresh semen was obtained inseminating with 160,000 spermatozoa/oocyte (F = 75.0%, H = 67.7%, LS = 32.7%). Similarly, the best reproductive performance for cryopreserved semen was achieved with 320,000 spermatozoa/oocyte (F = 70.0%, H = 48.6%, LS = 19.5%). Conclusion: it is possible to achieve adequate reproductive performance in bocachico fish using cryopreserved sperm (10% DMSO, 5.5% glucose, and 12% egg yolk) at twice the spermatozoa/oocyte ratio used with fresh semen.

Antecedentes: la crioconservación es una herramienta biotecnológica importante para la conservación de la biodiversidad, particularmente de especies en peligro. Objetivo: evaluar seis proporciones diferentes entre espermatozoides/ovocito en la fertilización de bocachico (Prochilodus magdalenae), usando semen fresco o crioconservado. Métodos: se colectó semen y se determinó su calidad para verificar su viabilidad de crioconservación. El semen fue colocado en pajillas de 5 mL y mezclado con una solución crioconservante (5,5% glucosa, 12% yema de huevo y 10% dimethyl sulfoxido -DMSO-) en una dilución 1:4 (semen:solución). El semen fue congelado en un termo de vapores de nitrógeno por 30 min y rápidamente se transfirió a termos de almacenamiento sumergiéndolo directamente en nitrógeno líquido (LN; -196 °C). Las pajillas fueron descongeladas a 60 ºC por 45 segundos. La motilidad, velocidad y progresividad de los espermatozoides, tanto de semen fresco como del congelado, fueron evaluadas usando el software Sperm Class Analyzer (SCA®). Cada proporción de espermatozoides/ovocito fue evaluada en 2 g de huevos (1.630 ± 87 huevos/g) para evaluar fertilidad (F), eclosión (H) y sobrevivencia larval (LS). Resultados: el mejor desempeño reproductivo con semen fresco fue obtenido inseminando con la proporción de 160.000 espermatozoides/ovocito (F = 75,0%, H = 67,7%, LS = 32,7%). De manera similar, el mejor desempeño reproductivo con semen crioconservado fue logrado con la proporción de 320.000 espermatozoide/ovocito (F = 70,0%, H = 48,6%, LS = 19,5%). Conclusión: es posible lograr un adecuado desempeño reproductivo en bocachico usando semen crioconservado (10% DMSO, 5,5% glucosa y 12% yema de huevo) cuando la relación espermatozoide/ovocito usada es del doble de la proporción aplicada para semen fresco.

Antecedentes: a criopreservação é uma ferramenta biotecnológica importante na conservação da biodiversidade, particularmente de espécies ameaçadas. Objetivo: foram avaliadas seis proporções de espermatozoides/ovócito na fertilização usando sêmen fresco e crioconservado em fertilização de bocachico (Prochilodus magdalenae), Métodos: o sêmen fresco foi coletado e determinada sua qualidade para verificar a viabilidade de crioconservação. O sêmen foi colocado em palhetas de 5 mL e misturado com a solução crioconservante (5,5% glicose, 12% gema de ovo e 10% dimetilsulfóxido -DMSO-) em numa diluição 1:4 (sêmen:solução). O sêmen foi congelado em botijão de vapores de nitrogênio por 30 min e rapidamente transferido a botijão de armazenagem submergindo-os diretamente em nitrogênio líquido (LN; -196 °C). As palhetas foram descongeladas a 60 ºC por 45 segundos. A motilidade, velocidade e progressividade dos espermatozoides, tanto de sêmen fresco quanto de congelado, foram avaliadas usando o software Sperm Class Analyzer (SCA®). Para avaliar fertilidade (F), eclosão (H) e sobrevivência larval (LS), cada relação de espermatozóide/oócito foi avaliada em 2 g de oócitos (1.630 ± 87 ovos/g). Resultados: o melhor desempenho reprodutivo com sêmen fresco foi obtido inseminando com proporção 160.000 espermatozoides/oócito (F = 75,0%, H = 67,7%, LS = 32,7%). O melhor desempenho reprodutivo com sêmen crioconservado foi verificado na proporção de 320.000 espermatozoides/oócito (F = 70,0%, H = 48,6%, LS = 19,5%). Conclusão: é possível alcançar um adequado desempenho reprodutivo em bocachico usando sêmen crioconservado (10% DMSO, 5,5% glicose e 12% gema de ovo) quando a proporção espermatozoide/oócito usada é o dobro da utilizada para sêmen fresco.

EVALUACIÓN DE ETILENGLICOL COMO CRIOPROTECTOR EN LA CRIOCONSERVACIÓN DE SEMEN DE BAGRE BLANCO (Sorubim cuspicaudus, PIMELODIDAE) / Evaluation of Ethylene Glycol as a Cryoprotectant in the Sperm Cryopreservation of Trans-Andean Shovelnose Catfish (Sorubim cuspicaudus, Pimelodidae)

Se evaluó el semen crioconservado de Sorubim cuspicaudus utilizando etilenglicol (ETG) a tres niveles de inclusión (5, 10, 15 %). Machos (n = 13) en fase de espermiación y hembras (n = 6) en maduración final se indujeron con 0,4 ml de Ovaprim®/Kg, después de 12 a 14 horas post-inducción se colectó el semen en viales Eppendorf de 2 ml de capacidad. Las diferentes soluciones crioprotectoras se prepararon con glucosa 6 % (p/v), leche en polvo descremada 5 % (pv) y agua destilada. El semen fue diluido en proporción 1:3 (semen:diluyente), empacado en macrotubos de 2,5 ml y congelado en vapores de nitrógeno líquido (NL) durante 30 minutos y luego almacenados en termos criogénicos sumergidos directamente en NL (- 196°C). El semen crioconservado fue descongelado en baño serológico a 35°C durante 90 segundos. La movilidad total, progresividad y velocidad espermática del semen fresco y descongelado se analizó con el software Sperm Class Analizer SCA® (Microptic SL, España). La fertilidad y eclosión se evaluó con 1,0-1,5 g de ovocitos en incubadoras experimentales de flujo ascendente de dos litros de capacidad. Se utilizó un diseño completamente aleatorizado. El semen fresco registró tasa de eclosión de 51,8°21 %, sin observarse diferencia significativa con la obtenida con el semen crioconservado con ETG 5 % (38,6 ° 13,9 %) (p> 0,05); mientras que ETG 15 % (9,6 ° 2,9 %) reportó la menor eclosión (p < 0,05). Los resultados sugieren que la solución crioprotectora compuesta por ETG 5 %, glucosa 6 % y leche en polvo 5 % es una alternativa viable para la crioconservación de semen de Sorubim cuspicaudus con fecundaciones similares al usar semen fresco.

The catfish Sorubim cuspicaudus cryopreservation semen was evaluated using three levels (5, 10, 15 %) of ethylene glycol (ETG). Males (n = 13) undergoing spermiation and in final maturation females (n = 6) were induced with 0.4 ml Ovaprim®/Kg, after 12 and 14 post-induction the semen was collected in 2 ml Eppendorf vials. The different cryoprotectants solutions were prepared with glucose 6 % (w/v) skimmed milk powder 5 % (w/v) and distilled water. The semen was diluted in ratio 1:3 (semen:extender), packed in macrotubes of 2.5 ml and frozen in liquid nitrogen (NL) vapor for 30 minutes, then the macrotubes were stored in cryogenic tanks submerged directly in NL (-196°C). The sperm were thawed in serological bath to 35°C for 90 seconds. The total motility, total progressivity and velocities in fresh and thawed semen were analyzed with the Sperm Class Analyzer software SCA® (Microptic SL, Spain). Fertility and hatching rates were assessed with 1.0-1.5 g of oocytes in experimental up flow incubators two liters, a completely randomized design was used. The hatching rate of fresh semen was 51,8°21 %, with no significant differences with semen cryopreserved with ETG 5 % (38.6 ° 13.9 %) (p> 0,05), while ETG 15 % (9.6 ° 2.9 %), recorded the lower hatching rate (p < 0.05). The results suggest that the cryoprotectant solution composed of ETG 5 %, glucose 6 % and powdered milk 5 % is a viable alternative for semen cryopreservation of the catfish Sorubim cuspicaudus.

Manejo de la primera alimentación de dorada Brycon sinuensis ofreciendo larvas de bocachico Prochilodus magdalenae / First feeding of Dorada (Brycon sinuensis) with Bocachico (Prochilodus magdalenae) larvae / Manejo da primeira alimentação de dorada Brycon sinuensis forneciendo larvas de bocachico Prochilodus magdalenae

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de la densidad de presas en la larvicultura de dorada Brycon sinuensis, para lo cual fueron ofrecidas, durante 24 horas, cuatro proporciones presa-predador 0:1 (T1), 1:1 (T2), 2:1 (T3) y 4:1 (T4) al inicio de la alimentación exógena. Como presa fueron utilizadas larvas recién eclosionadas de bocachico Prochilodus magdalenae, suministradas por una sola vez. Las larvas de dorada se pesaron y se midieron al inicio y al final del experimento para estimar ganancia en peso (Gp), ganancia en longitud (Gl) y tasa de crecimiento específico (G); también se calculó la sobrevivencia (S), resistencia al estrés (Re), mortalidad natural (Mn) y por canibalismo (Mc). Los mayores valores de Gp (3.9 ± 0.4 mg) y G se registraron en T4 (5.8 ± 0.4%/h), presentando diferencia significativa con los demás tratamientos (p<0.05); mientras que los mayores registros de Gl se presentaron en T2, T3 y T4 (2.0-2.4 mm), sin presentarse diferencia significativa entre estos tratamientos (p>0.05); pero si con relación a T1. Cuando se alimentó con dos (T3=84.2%) y cuatro larvas forrajeras por cada larva de dorada (T4=86.7%) se observaron las mayores sobrevivencias; mientras que la menor se obtuvo cuando no se suministraron larvas forrajeras (T1=51.8%); encontrándose en ese tratamiento la mayor mortalidad por canibalismo (46.3%). Asimismo, las menores mortalidades por canibalismo se presentaron cuando se ofrecieron entre dos (T3=12.7%) y cuatro larvas forrajeras por cada larva de dorada (T4=12.0%). La mortalidad natural fue baja y osciló entre 1.3% (T4) y 3.2% (T3) sin observarse diferencia significativa (p>0.05). Los valores de la prueba de Re oscilaron entre 86.7 ± 10.3% (T1) y 95.0 ± 5.5% (T3) sin observarse diferencia significativa (p>0.05). Estos resultados indican que suministrar entre dos y cuatro larvas forrajeras como primera alimentación en dorada reduce el canibalismo y ofrece mejores resultados de sobrevivencia y crecimiento durante la larvicultura.

This study evaluated several predator-prey ratios on Dorada (Brycon sinuensis) larviculture. The onset of exogenous feeding using four predator-prey ratios 0:1 (T1), 1:1 (T2), 2:1 (T3) and 4:1 (T4) was studied. The preys used were newly hatched Bocachico (Prochilodus magdalenae) larvae, which were fed just once. The Dorada larvae were weighed and measured at the beginning and the end of the experiment. The variables measured were weight gain (Wg), length gain (Gl), specific growth rate (G), survival (S), stress resistance (Rs), natural mortality (Nm) and cannibalism mortality (Mc). The T4 had the highest Wg (3.9 ± 0.4 mg) and G (5.8 ± 0.4%/h). Survivability was increased when feeding two (T3 = 84.2%) and four forage larvae for each Dorada larvae (T4 = 86.7%). The lowest survivability was observed when no forage larvae were fed (T1 = 51.8%), coinciding with the greatest mortality from cannibalism (46.3%). The lowest mortality from cannibalism occurred when two (T3 = 12.7%) to four forage larvae per Dorada larvae (T4 = 12.0%) were offered. Natural mortality was low, ranging between 1.3% (T4) and 3.2% (T3) (p> 0.05). The test values of Rs ranged from 86.7 ± 10.3% (T1) and 95.0 ± 5.5% (T3) (p>0.05). These results indicate that offering between two and four forage larvae as first feeding to Dorada larvae reduces cannibalism and offers the best results for survival and growth during larviculture.

O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da densidade de presas na larvicultura de Dorada Brycon sinuensis, para o qual foram fornecidas, durante 24 horas, quatro diferente proporção presa-predador 0:1 (T1), 1:1 (T2), 2:1 (T3) e 4:1 (T4) ao inicio da alimentação exógena. Como presa foram utilizadas larvas recém eclodidas de Bocachico Prochilodus magdalenae, as cuais foram fornecidas por uma única vez. As larvas de Dorada foram pesadas e medidas ao inicio e final do experimento para calcular ganho de peso (Gp), ganho de comprimento (Gl) e taxa de crescimento específico (G); também foi calculada a supervivência (S), resistência ao estresse (Re), mortalidade natural (Mn) y mortalidade pelo canibalismo (Mc). Os maiores valores de Gp (3.9 ± 0.4 mg) e G (5.8 ± 0.4%/h) foram registradas no T4, apresentando diferença com os demais tratamentos (p<0.05); entanto que os maiores registros de Gl (2.0-2.4 mm) apresentaram se entre os tratamentos T2, T3 e T4 sem apresentar se diferença significativa entre estes (p>0.05); mas sim com relação a T1. Quando foi alimentado com duas (T3 = 84.2%) e quatro larvas forrageiras por cada larva de dorada (T4 = 86.7%) foram observadas as maiores supervivências; ainda que a menor obteve se quando não foram fornecidas larvas forrageiras (T1 = 51.8%); foi encontrado nesse tratamento a maior mortalidade pelo canibalismo (46.3%). Assim mesmo, as menores mortalidades por canibalismo apresentaram-se quando foram fornecidas entre duas (T3 = 12.7%) e quatro larvas forrageiras por cada larva de Dorada (T4 = 12.0%). A mortalidade natural foi baixa e oscilou entre 1.3% (T4) e 3.2% (T3) sem diferença significativa (p>0.05). Os valores do teste de Re estiveram entre 86.7 ± 10.3% (T1) e 95.0 ± 5.5% (T3) sem diferença significativa (p>0.05). Estes resultados indicam que fornecer entre duas e quatro larvas forrajeiras como primeira alimentação em larvas de Dorada diminui o canibalismo e oferece melhores resultados de supervivência e crescimento durante a larvicultura.

Evaluation of milt quality of the yamú Brycon amazonicus under hormonal induction

Two-year old and first sexual maturation male Yamú Brycon amazonicus were selected, according to the presence of semen under gentle abdominal pressure (body weight BW 1.300 ± 3 g; Total length TL 41.4 ± 0.2 cm, mean ± SEM). Five treatments were carried out: three with mGnRHa (10, 15 and 20 µg/kg in a single dose), one with carp pituitary extract CPE (4.4 mg/kg in two applications, 10 and 90 por ciento with a 12 h interval) and a treatment control with application only of saline solution (0.9 por ciento). The volume, spermatic concentration, spermatocrit, fertility rate, percentage of live spermatozoa, motility and activation time were evaluated. The CPE caused an increase in volume, a decrease in sperm concentration and spermatocrit. A positive linear regression between the spermatocrit and the sperm concentration was found (p<0.05, r= 0.42). The fertility rate was evaluated by the ration of spermatozoa/eggs, which oscillated between 3.06 ± 0.2 x 105 and 6.75 ± 0,3 x 105, without displaying an effect on fertility rate (p>0.05). For the other parameters evaluated, there were no differences, between the hormones utilized, or between them and the control. It was concluded that the CPE influences, the sperm fluidity, increasing the volume and decreasing the concentration, while the mGnRH-a does not cause any quantitative or qualitative changes in the yamú semen.

Efecto de la densidad de siembra en el alevinaje de la dorada (Brycon sinuensis Dahl, 1955) / Effect of stocking density in the rearing of dorada (Brycon sinuensis) fingerlings

Con el objeto de evaluar el efecto de la densidad de siembra en el alevinaje de dorada Brycon sinuensis se sembraron postlarvas (PL) de dos días de nacidas, con 8.0 mm de longitud total (LT) y 6.3 mg de peso (P), a tres densidades diferentes (50, 100 y 150 PL/m2), en nueve estanques en tierra de 50 m2 en el Centro de Investigación Piscícola de la Universidad de Córdoba (CINPIC). Las PL fueron alimentadas dos veces al día con dieta comercial de 34 por ciento de proteína bruta. Se realizaron muestreos los días 0, 6, 12 y 18 para evaluar el crecimiento; con los valores promedio de LT y P se calculó la tasa de crecimiento específico (G). La productividad final se evaluó a través de la biomasa por área (BA) y el número de alevinos por área (AA). Se realizó un monitoreo diario de temperatura, oxígeno disuelto, pH y transparencia del agua de los estanques. La dureza, alcalinidad y amonio total se midieron cada cinco días. Los resultados se expresaron como promedio±desviación estándar. Las características del agua de los estanques se mantuvieron dentro del rango considerado normal para la piscicultura de especies neotropicales. Al final de los 18 días de cultivo los valores de LT y P oscilaron entre 30.3 mm y 357.5 mg (150 PL/m2) y 37.5 mm y 743.9 mg (50 PL/m2), respectivamente. La sobrevivencia osciló entre 59.9 (150 PL/m2) y 85.4 por ciento (100 PL/m2). Los valores de G oscilaron entre 25.1 (150 PL/m2) y 28.9 por ciento/día (50 PL/m2). La BA osciló entre 22.2 (50 PL/m2) y 46.0 g/m2 (100 PL/m2). En ninguna de las anteriores variables se observó diferencia estadística significativa entre las densidades evaluadas (p>0.05). Los valores de AA en el alevinaje donde se sembró a 100 PL/m2 (85.4 Ind/m2) y 150 PL/m2 (89.8 Ind/m2) no presentaron diferencia estadistica significativa (p>0.05); pero fueron entre 2.4 y 2.6 veces el obtenido a 50 PL/m2 (34.9 Ind/m2) (p<0.05). Los resultados del presente estudio permiten sugerir que el alevinaje de la dorada se puede realizar, por...

Evaluación del cultivo de dorada (Brycon sinuensis Dahl, 1955) en estanques a diferentes densidades de siembra / Evaluation of dorada´s culture (Brycon sinuensis Dahl, 1955) in ponds at different stocking densities

Se evaluó el cultivo de la dorada (Brycon sinuensis) a diferentes densidades de siembra. La longitud y peso de siembra fueron de 4.6±0.1 cm de longitud horquilla (LH) y 1.6±0.2 gramos (g), y 14.2±0.4 cm LH y 42.5±7.2 g en levante y preceba, respectivamente. Se alimentó con dieta comercial de 24 por ciento de proteína bruta y 2600 Kcal/Kg y el tiempo de cultivo fue de 129 días. Los parámetros físico-químicos fueron: oxígeno disuelto, 3.1±0.5 mg/L; temperatura 30.4±0.1 °C; y pH 5.8±0.2; sólidos totales disueltos 73.7±1.1 mg/L y conductividad, 148.0±2.3 µS/cm. Los mejores valores para crecimiento en longitud y peso fueron 14.7±1.3 cm LH (T1) y 45.4±10.2 g (T1) y 20.2±1.2 cm LH (T2) y 116.8±18.8 (T2) g enlevante y preceba, respectivamente, sin diferencias significativas entre tratamientos (p>0.05). Las tasas de crecimiento fueron similares y bajas; la sobrevivencia fue muy baja durante el levante (20.6 por ciento ±18.8), mejorando en preceba (98.1 por ciento ±0.4); y el mejor rendimiento en biomasa fue de 3842.3 g (T3) y 6253.2 g (T3) en levante y preceba, respectivamente. En general, se infiere que el tratamiento 3 alcanzó los mejores resultados, que el oxígeno, la temperatura y el pH del agua de los estanques afectaron el crecimiento y desarrollo de los peces, y que la dorada no asimiló eficientemente la dieta suministrada durante el cultivo, debido a que el alimento consumido fue utilizado para el mantenimiento o sobrevivencia y no para el crecimiento.